醫(yī)院PCR實(shí)驗(yàn)室進(jìn)行設(shè)計(jì)發(fā)展要求

醫(yī)院PCR實(shí)驗(yàn)室進(jìn)行設(shè)計(jì)發(fā)展要求：

試劑貯存和準(zhǔn)備區(qū)

試驗(yàn)區(qū)的主要操作是儲(chǔ)存試劑的制備、試劑的包裝和主要反應(yīng)混合物的制備。手術(shù)室層流凈化坐南朝北，位于建筑的較高處，以保持空氣潔凈、防止院內(nèi)感染為原則，地面、墻壁可以沖洗。要三區(qū)劃分合理：即有非限制區(qū)、半限制區(qū)、限制區(qū)。要有三通道：即工作人員通道、病人出入通道、污物出口通道。材料應(yīng)防火、耐濕、不易著色，以具有易于清潔等性能的材料為宜?，F(xiàn)代化手術(shù)室應(yīng)設(shè)計(jì)有：空氣凈化裝置、中心供氧、中心吸引等裝置。長沙凈化公司創(chuàng)造潔凈手術(shù)室的一種設(shè)備，無論它多么先進(jìn)，但亦非"萬能"；因?qū)恿飨到y(tǒng)并無消毒滅菌之功效，層流手術(shù)室其"無菌"環(huán)境主要是通過空氣的"過濾"、"層流"以及室內(nèi)維持"正壓"狀態(tài)來維持的。凈化手術(shù)室為病人提供手術(shù)及搶救的場所，是醫(yī)院的重要技術(shù)部門。手術(shù)室應(yīng)與手術(shù)科室相接連，還要與血庫、監(jiān)護(hù)室、麻醉復(fù)蘇室等臨近。抓好手術(shù)切口感染四條途徑的環(huán)節(jié)管理，即：手術(shù)室的空氣；手術(shù)所需的物品；醫(yī)生護(hù)士的手指及病人的皮膚，防止感染，確保手術(shù)成功率。用于樣品制備的試劑和材料應(yīng)直接送到該區(qū)域，不得通過其他區(qū)域。試劑原料必須儲(chǔ)存在該區(qū)域，并準(zhǔn)備成所需的儲(chǔ)存試劑。

在這方面對氣流壓力的控制沒有嚴(yán)格要求。

標(biāo)本制備區(qū)

該區(qū)域發(fā)展主要問題進(jìn)行的操作為中國臨床研究標(biāo)本的保存、核酸(RNA、DNA)提取、貯存技術(shù)及其企業(yè)加入至擴(kuò)增以及反應(yīng)管和測定RNA時(shí)cDNA的合成。

該區(qū)域的氣壓梯度必須相對于鄰近區(qū)域?yàn)檎?，以避免氣溶膠污染物從鄰近區(qū)域進(jìn)入該區(qū)域。此外，由于在取樣工作期間可能會(huì)出現(xiàn)氣溶膠污染，因此應(yīng)避免在該區(qū)域內(nèi)進(jìn)行不必要的移動(dòng)。

擴(kuò)增進(jìn)行反應(yīng)形成混合物配制和擴(kuò)增區(qū)

在該區(qū)域進(jìn)行的主要操作是DNA或cDNA擴(kuò)增。 此外，也可以在該區(qū)域中進(jìn)行添加所制備的DNA模板和合成的cDNA(來自樣品制備區(qū))以及將主反應(yīng)混合物(來自試劑儲(chǔ)存和制備區(qū))制備成反應(yīng)混合物等。 在巢式PCR測定中，通常需要在第一次擴(kuò)增之后打開反應(yīng)管，因此巢式擴(kuò)增具有高的污染風(fēng)險(xiǎn)，并且必須在該區(qū)域中進(jìn)行第二次取樣。

該區(qū)域的壓力梯度要求有一個(gè)相對于鄰近區(qū)域的負(fù)壓，以避免氣溶膠從該區(qū)域泄漏。為避免氣溶膠造成的污染，應(yīng)盡量減少在該區(qū)域不必要的行走。應(yīng)在超凈化臺(tái)中進(jìn)行額外取樣等單獨(dú)操作。

擴(kuò)增產(chǎn)物分析區(qū)

該區(qū)域主要進(jìn)行的操作為擴(kuò)增片段的測定。如使用全自動(dòng)封閉分析儀器檢測，此區(qū)域可不設(shè)。

本區(qū)是最主要的擴(kuò)增產(chǎn)物污染來源，因此對本區(qū)的壓力梯度的要求為：相對于鄰近區(qū)域?yàn)樨?fù)壓，以避免擴(kuò)增產(chǎn)物從本區(qū)擴(kuò)散至其它區(qū)域。